水产科学

作者：谢伟, 蒋琦辰, 孙宾, 杨颖, 李鹏, 严洁, 周开亚

单位：1.南京师范大学 生命科学学院,江苏 南京 210023;2.江苏省淡水水产研究所,江苏 南京 210017

关键词：克氏原螯虾, Cyc基因, 克隆, mRNA表达, 生物信息学

基金：国家虾蟹产业技术体系克氏原螯虾种质资源与遗传育种岗位项目(CARS-48);江苏省高等学校自然科学研究重大项目(19KJA330001);江苏省水生生物资源重大专项(ZYHB16-3);江苏省海洋渔业资源环保项目;江苏省现代农业(克氏原螯虾)产业技术体系项目(JATS[2020]365);江苏省农业重大新品种创制项目(PZCZ201746);江苏省高等学校自然科学研究面上项目(17KJD240001).

利用cDNA末端快速扩增技术克隆克氏原螯虾生物钟核心基因之一的周期循环蛋白(CYC)基因(命名为PcCyc基因)的部分cDNA序列。取雄性克氏原螯虾(体长9~11 cm)在全光谱日光灯不同光周期下(12L∶12D、0L∶24D和0L∶72D)培养结束后,于7:00、11:00、15:00、19:00、23:00、翌日03:00、7:00取样,采用实时荧光定量PCR检测PcCyc基因在脑、眼柄和肝胰腺中的mRNA表达水平。试验结果显示,PcCyc基因完整的开放阅读框共2010个碱基,可编码669个氨基酸。氨基酸序列与红螯螯虾CYC蛋白相似性为94%;蛋白分子量约73.963 ku,理论等电点6.56,为疏水性非分泌蛋白,无信号肽;结构域分析结果显示,PcCYC蛋白含有BHLH/PAS结构域,包括1个HLH结构域和2个PAS结构域;二级结构包含11个α-螺旋、12个β-折叠和24个无规则卷曲。不论光照如何改变,PcCyc基因在眼柄和肝胰腺中都基本遵循着24 h的节律振荡,而在大脑中的节律振荡随光照周期改变被打破。试验结果将为进一步探究克氏原螯虾Cyc基因在其昼夜生物钟节律中发挥的作用及机制奠定基础。

来源：2021年第1期

《水产科学》期刊编辑部

查看水产科学杂志2021年第1期