水产科学

作者：尹伟力,吴葳,刘晓静,马晓玲,韩伟,吴宁宁,陈燕平

单位：1.烟台海关技术中心,山东 烟台 264000;2.武汉农业检测中心,湖北 武汉 430016;3.荣成海关,山东 荣成 264300;4.上海医药集团 青岛国风药业股份有限公司,山东 青岛 266000;5.青岛海关技术中心,山东 青岛 266000

关键词：十足目虹彩病毒1,重组酶聚合酶扩增技术,快速检测

基金：国家重点研发计划项目(2017YFF0211103);海关总署科研项目(2019IK034);国家质量监督检验检疫总局科研项目(2017IK232).

为建立十足目虹彩病毒1的快速检测方法,根据十足目虹彩病毒1的ATP酶基因(ORF114R)保守序列设计特异性引物,通过条件优化,建立基于重组酶聚合酶扩增技术的十足目虹彩病毒1检测方法。重组酶聚合酶扩增技术的最优扩增温度为30 ℃,恒温反应20 min内即可完成。特异性试验结果显示,该方法与其他常见虾类感染病毒无交叉反应。敏感性试验结果显示,该方法对十足目虹彩病毒1的最低检出限为7 拷贝/μL,低于传统的巢式PCR方法。利用已建立的重组酶聚合酶扩增技术方法和PCR方法对采集的509批临床样品进行检测,试验结果表明,重组酶聚合酶扩增技术能够有效检出PCR方法的弱阳性样品,表明重组酶聚合酶扩增技术可以用于临床检测。笔者建立的检测十足目虹彩病毒1的重组酶聚合酶扩增技术具有快速、简便、特异性强、灵敏度高的特点,适合基层实验室及现场检测。

来源：2021年第2期

《水产科学》期刊编辑部

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