水产科学

作者：崔淼, 吴敏, 刘茹, 黎晶晶, 张辉杰, 许德麟, 张其中

单位：暨南大学 水生生物研究所,热带亚热带水生态工程教育部工程研究中心,广东省高校水体富营养化与赤潮防治重点实验室,广东 广州 510632

关键词：罗非鱼,无乳链球菌,海豚链球菌,早期预警,分子检测

基金：广东省基础与应用基础研究基金资助项目(2019A1515012112,2019A1515011791);广东省科技专项资金资助项目(粤财科教〔2019〕170号);广东省海洋与渔业厅科技项目(A201601B05);广州市科技计划项目产学研协同创新重大专项 (201604020029);广州市农村科技特派员项目(GZKTP2020032).

为提高罗非鱼链球菌病发前的早期预警,根据海豚链球菌的16S rRNA基因的部分序列和无乳链球菌的Sip基因特异性序列,分别合成特异性检测引物,经过对反应体系和反应条件的优化,建立检测较低含量的无乳链球菌和海豚链球菌的分子技术。试验结果显示,所建立的双重PCR可扩增出870 bp无乳链球菌和614 bp海豚链球菌的特异性片段,而迟钝爱德华氏菌、维氏气单胞菌、创伤弧菌、温和气单胞菌、溶藻弧菌、大肠杆菌均为阴性;无乳链球菌和海豚链球菌基因组DNA最低检测量分别为9.84×10-5 ng/μL和9.30×10-5 ng/μL,菌液最低检测量分别为2.76×103 cfu/mL和2.51×103 cfu/mL,远低于其半致死密度107 cfu/mL;对无乳链球菌和海豚链球菌混合感染的模拟临床样品的检出率为100%。研究结果表明,该分子技术的特异性较强、灵敏度较高、检出率较高,可用于较低含量的无乳链球菌和海豚链球菌的快速鉴别,为罗非鱼链球菌的早期预警分子检测提供技术支持。

来源：2021年第4期

《水产科学》期刊编辑部

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