水产科学

作者：林建城, 吴建洪, 林娟娟

单位：莆田学院 环境与生物工程学院,福建省新型污染物生态毒理效应与控制重点实验室,生态环境及其信息图谱福建省高等学校重点实验室,福建 莆田 351100

关键词：二甲亚砜,中国鲎,N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶,抑制作用,构象变化

基金：福建省自然科学基金资助项目(2018J01467);福建省新型污染物生态毒理效应与控制重点实验室开放课题项目(PY16009);莆田市科技计划项目(2021ZP09).

节肢动物的周期性蜕皮与N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52,NAGase)密切相关。从中国鲎内脏分离提取N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶,利用酶抑制作用动力学方法研究二甲亚砜对中国鲎N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的影响。试验结果显示:二甲亚砜对中国鲎N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶有较强的抑制作用,0.1 mol/L二甲亚砜可使酶活性下降38.0%,该抑制作用为可逆过程;动力学研究显示,二甲亚砜对N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的抑制作用是属于竞争性-非竞争性混合型抑制,二甲亚砜对游离酶(E)的抑制常数(KI)和对酶-底物络合物(ES)的抑制常数(KIS)分别为0.200 mol/L和1.063 mol/L,KI<KIS,表明底物对N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶在二甲亚砜溶剂中的失活具有保护作用,随着底物浓度增大,二甲亚砜对酶的失活作用降低;酶蛋白的紫外吸收光谱和内源荧光发射光谱显示,随着二甲亚砜溶剂浓度升高,N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶酶蛋白紫外吸收值亦在升高,但其内源荧光发射强度减弱,两者峰值均无位移,在0.65 mol/L二甲亚砜溶剂中酶蛋白荧光强度接近于0,表明N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶在二甲亚砜溶剂中蛋白空间构象发生了变化导致了酶失活现象。试验结果表明,二甲亚砜对中国鲎N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶发挥明显的抑制作用,这可能会进一步影响中国鲎的蜕皮。

来源：2023年第4期

《水产科学》期刊编辑部

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