水产科学

作者：徐超楠, 孙雨雨, 王佳, 郭宝琴, 魏畅, 李强

单位：1.大连海洋大学 水产与生命学院,辽宁 大连 116023; 2.盐城工学院 海洋与生物工程学院,江苏 盐城 224051

关键词：异育银鲫, 鲤疱疹病毒Ⅱ型, ORF72, 单克隆抗体,间接免疫荧光

基金：国家自然科学基金资助项目(32102849);江苏省重点研发计划 (BE2021326).

鲤疱疹病毒Ⅱ型是引起鲫造血器官坏死病的重要病原。为建立基于抗原水平的免疫检测方法,通过原核表达方法制备鲤疱疹病毒Ⅱ型核衣壳蛋白ORF72,将纯化的ORF72蛋白免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术筛选获得单克隆抗体1B3、4B1、4C2、5F4和5H9。免疫印迹分析显示,上述5株单抗均可特异性识别重组蛋白ORF72;免疫荧光分析显示,仅单抗4C2可与感染鲤疱疹病毒Ⅱ型的鲫脾脏发生阳性反应。利用单抗4C2通过间接免疫荧光技术对鲤疱疹病毒Ⅱ型感染鎏金金鱼鳍条细胞系(RyuF-2)后ORF72蛋白表达情况进行检测,结果显示,感染后36 h可检测到阳性信号,并且随着感染时间的延长,细胞中ORF72的表达量明显增加。本试验制备的单克隆抗体4C2为体外进一步探究鲤疱疹病毒Ⅱ型在细胞内的复制机制及建立病鱼免疫检测手段奠定了基础。

来源：2024年第4期

《水产科学》期刊编辑部

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