水产科学

作者：文静, 郑树城, 柯紫姗, 王英英, 李莹莹, 莫绪兵, 张德锋, 尹纪元, 周文礼, 王庆

单位：1.天津农学院 水产学院,天津 300384; 2.中国水产科学研究院 珠江水产研究所,农业农村部渔用药物创制重点实验室,广东省水产动物免疫与绿色养殖重点实验室,广东 广州 510380

关键词：罗非鱼,罗非鱼湖病毒,血管紧张素Ⅱ2型受体,G蛋白偶联受体

基金：国家重点研发计划项目(2019YFD0900101);广东省重点领域研发计划项目(2022B1111030001);广东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金资助项目(2022KJ150).

为研究罗非鱼血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2-R)在罗非鱼湖病毒(TiLV)感染过程中的功能,通过RT-PCR技术克隆得到体质量(20±5) g罗非鱼AT2-R(OnAT2-R)基因完整的开放阅读框序列,并运用qRT-PCR分析OnAT2-R基因的组织分布及时相表达,同时构建重组真核表达载体pEYFP-OnAT2-R,在罗非鱼脑细胞中进行亚细胞定位分析,最后通过罗非鱼脑细胞过表达OnAT2-R基因后感染罗非鱼湖病毒,利用qRT-PCR方法检测TiLV-S8片段的相对表达量。试验结果显示,OnAT2-R基因开放阅读框序列全长1338 bp,编码445个氨基酸,具有1个7次跨膜区域。在罗非鱼被检测的各个组织中,OnAT2-R基因均有分布,肝脏的表达量最高,其次是肌肉和皮肤,脾脏和胃的表达量最低。健康罗非鱼感染罗非鱼湖病毒后,OnAT2-R基因在肝脏中的表达量先增后减,在肌肉中的表达量先增后减再增。成功构建了pEYFP-OnAT2-R,亚细胞定位结果显示OnAT2-R主要定位于细胞膜上。在罗非鱼脑细胞中过表达OnAT2-R基因后感染罗非鱼湖病毒,发现TiLV-S8节段的mRNA水平显著降低。试验结果表明,OnAT2-R是一个潜在的定位于细胞膜且具有抑制罗非鱼湖病毒复制作用的细胞表面分子受体,这为后续深入研究罗非鱼湖病毒感染机理及罗非鱼抗病毒机制提供理论参考。

来源：2024年第5期

《水产科学》期刊编辑部

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