水产科学

作者：孙晓晗, 代树坤, 林思宇, 郭晓琳, 赵凯旋, 杨祖晶, 张志峰, 秦贞奎

单位：1.中国海洋大学, 海洋生物遗传学与育种教育部重点实验室, 山东 青岛 266003; 2.中国海洋大学, 山东省海水种业重点实验室(筹), 山东 青岛 266003; 3.中国海洋大学 三亚海洋研究院, 海南省热带水产种质重点实验室, 海南 三亚 572000

关键词：电穿孔转染,外源基因导入,侏儒蛤,卵子

基金：国家自然科学基金资助项目(32070516).

外源基因导入技术在以贝类为代表的水产经济物种性状改良方面发挥着举足轻重的作用,然而相关技术平台的局限性严重制约了重要性状分子机制的解析及遗传育种工作的深入开展。为寻找合适的外源基因导入方法并在贝类中开展应用,选用潜在的贝类模式生物侏儒蛤的ef1α基因启动子序列构建荧光报告基因载体,通过体外试验筛选获得具备高表达活性的ptdTomato-ef1α2524质粒,随后采用电穿孔转染将报告基因质粒导入侏儒蛤卵子,优化了电压、脉冲时长、脉冲次数及质粒质量浓度等电穿孔试验参数,并对胚胎幼虫存活率及电穿孔效率进行评估。试验结果表明,筛查确定最佳电穿孔参数为:海水作为电转缓冲液,质粒质量浓度60 μg/mL,电压150 V,脉冲时长1 ms,电穿孔1次,在此条件下所获电穿孔效率为(33.66±2.71)%。本试验成功实现了利用电穿孔转染将载体高效递送至侏儒蛤卵子,建立了适用于贝类的电穿孔技术体系,为贝类等水产动物的分子机制解析、基因功能研究以及育种技术开发提供坚实的技术支撑,有力推动贝类基因编辑技术的进步与发展。

来源：2025年第6期

《水产科学》期刊编辑部

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